Evidencia serológica de ehrlichiosis humana en Ancash, Perú / Serological evidence of human ehrlichiosis in Ancash, Perú

Se desarrolló y estandarizó una prueba de inmunofluorescencia indirecta para detección de IgG e IgTotal para el diagnóstico de Ehrlichiosis humana. Se utilizó como antígeno, a células DH82 infectadas con Ehrlichia chaffeensis cepa Sapulpa, se consideró una dilución de 1/64 como positivo. Se evaluó 130 sueros de pacientes febriles negativos para Rickettsiosis y enfermedad de Carrión procedentes de Ancash, que ingresaron al Instituto Nacional de Salud entre los años 2004 a 2006. Se encontró que 12 (9,2%) sueros fueron positivos a Ehrlichiosis. Teniendo en cuenta que es una enfermedad emergente y con el desarrollo de esta prueba, es recomendable iniciar estudios epidemiológicos y de vigilancia de la Ehrlichiosis en el Perú.

We developed and standardized an indirect immunofluorescence test for detection of IgG and IgTotal for diagnosing human Ehrlichiosis. It was used as antigen to DH82 infected cells with Ehrlichia chaffeensis Sapulpa strain; it was considered a dilution of 1/64 as positive. We evaluated sera from 130 febrile patients negative for Rickettsiosis and Carrion disease from Ancash, who entered at Instituto Nacional de Salud (Lima, Peru) between 2004 and 2006. We found that 12 (9.2%) sera were positive for Ehrlichiosis. Given that Ehrlichiosis is an emerging disease and with the development of this test, it should start monitoring and epidemiological studies of Ehrlichiosis in Peru.

Evaluación de pruebas de Elisa e inmunofluorescencia indirecta para la detección de anticuerpos IgM contra Rickettsiosis / Elisa and indirect immunofluorescent assays evaluation for IgM antibodies detection against Rickettsiosis

Se evaluó dos pruebas modificadas de ELISA e inmunofluorescencia indirecta (IFI) para la detección de IgM basadas en el lisado total de Rickettsia akari para el diagnóstico de Rickettsiosis. Se usaron 55 sueros negativos, 100 sueros positivos confirmados por IFI IgG Total y15 sueros con diagnóstico confirmado para otras enfermedades bacterianas procedentes de la seroteca del Instituto Nacional de Salud. La prueba de ELISA IgM tuvo una sensibilidad de 78,0 por ciento, especificidad de 80,0 por ciento, valor predictivo positivo de 87,6 por ciento y el valor predictivo negativo de 66,7 por ciento, con una reacción cruzada con otras etiologías bacterianas de 20 por ciento (3/15). La prueba de IFI IgM tuvo una sensibilidad de 82,0 por ciento, especificidad de 91,7 por ciento, valor predictivo positivo de 94,3 por ciento y valor predictivo negativo de 75,3 por ciento, con una reacción cruzada de 13 por ciento (2/15). El método ELISA IgM no es una prueba útil, a diferencia de la prueba IFI IgM que podría ser aplicada en el diagnóstico de Rickettsiosis para estudios epidemiológicos y de vigilancia en el Perú.

We evaluated two modified tests of ELISA and indirect immunofluorescence (IFI) for detecting IgM based on the total lysate of Rickettsia Akari for Rickettsiosis diagnosing. 55 negative sera were used, 100 positive sera confirmed by IFI IgGTotal and 15 sera with a confirmed diagnosis for other bacterial diseases from the serum of the Instituto Nacional de Salud (Lima, Perú). IgM ELISA test had a sensitivity of78.0 per cent, 80.0 per cent specificity, positive predictive value of 87.6 per cent and negative predictive value of 66.7 per cent, and have a 20 per cent (3/15) cross-reaction with other bacterial aetiologies. The IFI IgM test had a sensitivity of 82.0 per cent, specificity of 91.7 per cent, positive predictive value of 94.3 per cent and negative predictive value of 75.3 per cent, with a 13 per cent (2/15) cross-reaction. The IgM ELISA test is not useful, unlike the IFI IgM test that could be applied in diagnosing Rickettsiosis for surveillance and epidemiological studies in Peru.

Patogenicidad de las amebas de vida libre aisladas de fuentes de agua en Lima / Patogenicity of free-living amoebas isolates in body waters from Lima

Objetivos. Determinar la presencia de amebas de vida libre (AVL) en fuentes de agua del departamento de Lima y evaluar su capacidad patógena en ratones normales e inmunosuprimidos. Materiales y métodos. Se recolectaron muestras de agua de ríos, lagos, piscinas y pozos de Lima. El aislamiento se realizó por cultivo en agar no nutritivo al 2 por ciento con E. coli o E. aerogenes a 37 °C. Posteriormente se instiló en ratones normales e inmunosuprimidos (betametasona 1,4 mg/mL, dosis única) una suspensión con las amebas aisladas. A los 15 díasse evaluaron histológicamente los daños en ambos grupos. Resultados. Se identificaron AVL en 40/83 muestras, 31,3 por ciento de las muestras se desarrollaron en los cultivos. Se aislaron 26 cepas de AVL de siete géneros (Hartmannella, Acanthamoeba, Mayorella, Naegleria, Vahlkampfia, Vannella y Saccamoeba), Acanthamoeba fue la más frecuente (44,2 por ciento). Se encontraron AVL en 53,8 por ciento de los ratones inmunosuprimidos y 15,4 por ciento de los normales (p menor que 0,05). Conclusiones. Existen AVL en cuerpos de agua de Lima, las cuales tienen un potencial patógeno en pacientes inmunosuprimidos, existiendo un riesgo de infección amebiana asociada con estas fuentes de agua.

Objectives. To determine the presence of free-living amoeba (FLA) in water bodies from Lima department and assess their pathogenic ability in normal mice and immunosuppressed. Material and methods. Water samples were collected from rivers, lakes, swimmingpools and wells in Lima, Peru. The isolation was performed by culture in non-nutritious agar with 2 per cent of E. coli or E. aerogenes at 37 °C. Subsequently were injected into normal mice and immunosuppressed (betamethasone 1.4 mg/mL, a single dose) with a suspension of amoeba isolated. For the 15 days were assessed histological damage in both groups. Results. AVL were identified in 40/83 samples, 31.3 per cent of the samples were developed in cultures. 26 strains were isolated from AVL of seven genera (Hartmannella, Acanthamoeba,Mayorella, Naegleria, Vahlkampfia, Vannella and Saccamoeba), Acanthamoeba was the most frequent (44.2 per cent). AVL was found in 53.8 per cent of immunosuppressed mice and 15.4 per cent of the normal (p minor that 0.05). Conclusions. AVL exist in water bodies from Lima, which have a potential pathogen in immunosuppressed patients, there is a risk of amoebic infection associated with these water sources.

Inmunohistoquímica en el diagnóstico de fiebre amarilla / Immunohistochemistry in the diagnosis of yellow fever

Objetivo: Confirmar la presencia del antígeno del virus de la fiebre amarilla en muestras de hígado. Material y Métodos: Se aplicó la técnica de inmunohistoquímica en muestras de hígado de 34 pacientes procedentes de las diferentes regiones del país con diagnóstico clínico de fiebre amarilla, durante los años 1999 a 2001. A los cortes de tejido (hígado parafinizado) se aplicó esta técnica con anticuerpos monoclonales y policlonales contra FA y el complejo biotina-streptavidina. El control positivo fue el hígado de un paciente con diagnóstico serológico e histopatológico de fiebre amarilla y el control negativo una muestra de hígado obtenida de la necropsia de un paciente con patología no hepática. Resultados: La positividad se dio por una tinción marrón en el citoplasma hepático. Las muestras negativas carecen de esta tinción. Se confirmó la presencia de antígeno de fiebre amarilla durante los años 1999 al 2001. Las 34 muestras procedieron de los departamentos de San Martín, Junín, Cuzco, Huánuco, Loreto, Pasco, y Ucayali. Conclusión: La técnica de inmunohistoquímica constituye una herramienta de diagnóstico por su alta sensibilidad y especificidad (ambas 90 por ciento ), para estudios epidemiológicos en los que se puede realizar un diagnóstico retrospectivo.